服务优势
● 抗体特异富集：O8G 特异性抗体捕获修饰片段，富集后再测序
● G>T 突变读出：结合 G>T 突变分析定位单个 O8G 位点
● 配对 Input 对照：Input 文库支持稳健的富集分析与真实修饰判定
● miRNA 专精：聚焦 miRNA seed、pri-miRNA 与成熟 miRNA 群体
● 功能读出：把 O8G 位点与 miRNA–mRNA 靶向关系及生物学效应变化关联
● 一站式交付：从样本到可解读的 O8G 数据，附专业生物信息支持
背景介绍
O8G（8-氧代鸟嘌呤）是活性氧氧化 RNA 中鸟嘌呤后产生的氧化型 RNA 修饰。它与腺嘌呤配对，常诱导 G>T 突变，并与氧化还原驱动的疾病相关；作为新兴的表观转录组研究对象，O8G 正受到与 m6A 同等的关注。
2023 年一项发表于 Nature Cell Biology 的研究表明，miRNA seed 上广泛存在的 O8G 修饰可差异调控依赖氧化还原的癌症发生。
关键概念：O8G RNA单碱基测序（O8G-miSeq）是一种单碱基测序方法，通过特异性抗体富集 O8G-RNA，并结合 G>T 突变分析与 Input 对照，在单碱基分辨率上识别 miRNA 上的 O8G 位点。
图 1. O8G-miSeq 检测原理。
实验流程
图 2. O8G-miSeq 实验流程。
生物信息分析
生物信息分析流程以 Input 对照筛查 O8G 富集信号，通过 G>T 突变判定在单碱基分辨率上定位 O8G 位点，并报告 O8G 修饰前后的靶基因分析。分析内容包括位点表、motif 与分布图、差异修饰与基因组浏览器轨道。
交付内容
• O8G-IP 与 Input 文库的原始 FASTQ 数据文件，可直接提交至 GEO/SRA。
• 含 BAM 比对文件与核心比对统计的质控报告。
• 单碱基 O8G 位点表（XLSX），含坐标、位点分值与化学计量。
• miRNA/pri-miRNA 上的 O8G motif 与分布图（PDF/PNG）。
• O8G 差异修饰分析表（XLSX），含倍数变化等统计信息。
• 含 O8G 的 miRNA 的靶基因与功能富集报告。
• 兼容基因组浏览器的可视化文件（bigWig/bedGraph）及结构化项目报告。
研究应用
• miRNA seed：解析 seed 区 O8G 对靶基因识别的调节
• 氧化应激：比较氧化还原状态变化前后 O8G 位点的增减
• 癌症机制：把 O8G 图谱与氧化还原驱动的肿瘤表型关联
• 生物标志物：筛选疾病中差异 O8G 修饰的 miRNA 位点
常见问题
这项服务针对哪些 RNA 类型？
我们会在 miRNA 与 pri-miRNA 上分析 O8G，并配套 Input 对照文库，让单碱基修饰判定更稳健。
O8G 能否在单碱基分辨率上被检测？
可以。O8G 富集结合 G>T 突变分析与 Input 对照，可在单碱基分辨率上定位每个 O8G 位点。
该方法与基于抗体的 m6A 分析有何不同？
这一方法使用 O8G 特异性抗体与 G>T 突变判定；不同于区域级富集，它在 miRNA 上给出单碱基分辨率的 O8G 位点。
服务是否提供功能层面的解读？
分析结果会包含富集分析、G>T 突变位点判定，以及 O8G 修饰前后的靶基因分析。
高深度测序有何优势？
高深度 Illumina 测序确保有足够覆盖度解析低丰度 O8G miRNA 位点并定量其修饰水平。
参考文献
[1] Widespread 8-oxoguanine modifications of miRNA seeds differentially regulate redox-dependent cancer development. Nature Cell Biology 2023; DOI: 10.1038/s41556-023-01233-2
[2] Position-specific oxidation of miR-1 encodes cardiac hypertrophy. Nature 2019; DOI: 10.1038/s41586-019-1550-8