服务优势
● 区分帽子与内部位点：靶向化学转化把内部 m⁷G 与 5' 帽子结构区分开，避免帽子信号干扰
● 内部位点定量：每个内部 m⁷G 位点被记录为独特的逆转录特征，并给出修饰水平
● 无抗体读出：不依赖 m⁷G 抗体，回避富集偏倚与交叉反应
● 单碱基分辨率：位点精确到单个核苷酸，可映射到密码子与结构元件
● 注释完备：每个位点给出基因组坐标、宿主基因与功能区域归属
背景介绍
在 mRNA 中，该修饰影响转录本稳定性、翻译与基因调控，因此跨编码区与非翻译区的单碱基定位尤为关键。靶向化学转化可区分内部 N7-甲基鸟苷与 5' 帽子结构，将每个内部 m7G 位点记录为独特的逆转录特征，实现单碱基分辨率的定量。这套不依赖抗体的读出方式可在单碱基水平定位每个 m7G 位点。同一流程可扩展至长链非编码 RNA（lncRNA），让研究者可以在同一次实验里并行分析 mRNA 与 lncRNA 上的该修饰。
关键概念：m7G RNA单碱基测序（m7G-Quant-Seq）是一种单碱基分辨率方法，靶向化学转化可区分内部 N7-甲基鸟苷与 5' 帽子结构，在单碱基分辨率上检测并定量内部 m7G。
图 1. m7G-Quant-seq 内部 m7G 检测原理。
实验流程
图 2. m7G-Quant-seq 实验流程。
生物信息分析
生物信息分析流程将 reads 比对到参考转录组，识别 m7G-Quant-seq 转化特征，并在单碱基分辨率上定量内部 m7G 化学计量，涵盖 motif、分布、差异、富集与基因组浏览器分析。
交付内容
• 原始 m⁷G mRNA 测序 FASTQ 数据文件，可直接提交至 GEO/SRA 等公共数据库。
• 样本与测序质控报告，含排序后的 BAM 比对文件及核心比对统计。
• 高置信度单碱基 m⁷G 位点注释表（XLSX），含坐标、基因与定量结果。
• 单碱基 m⁷G 转录本特征分布图与一致性 m⁷G motif 分析图（PDF/PNG）。
• 单碱基分辨率 m⁷G 差异甲基化分析表（XLSX），含倍数变化等统计信息。
• m⁷G 修饰基因的功能富集分析报告（HTML/PDF/PNG）。
• 兼容基因组浏览器的可视化文件（bigWig/bedGraph）及完整的 m⁷G 分析项目报告。
研究应用
• 内部 m⁷G 图谱：在 mRNA 与 lncRNA 上绘制内部 m⁷G 位点图谱
• 与帽子区分：在带帽转录本上专门解析内部修饰位点
• 翻译调控：把位点级内部 m⁷G 与翻译效率和稳定性关联
• 疾病导向：筛选差异修饰位点作为候选生物标志物
常见问题
mRNA 上有哪些特征会被注释？
每个位点都会注释到参考转录组，并给出基因组坐标、宿主基因与功能区域，方便您把位点和基因功能放在一起解读。
该方法能否在单碱基分辨率上定量修饰？
可以。靶向化学转化可区分内部 N7-甲基鸟苷与 5' 帽子结构，将每个内部 m7G 位点记录为独特的逆转录特征，在单碱基分辨率上给出定量结果，并在 mRNA 中给出每个位点的定量结果；反应无需抗体且可重复，因此判定特异。
该方法与基于抗体的 mRNA 分析有何不同？
抗体法依赖富集，分辨率有限，也容易带入固有的 motif 偏好。我们的方法不使用抗体，直接在 mRNA 上给出单碱基分辨率的定量结果，既避开了交叉反应与富集偏倚，也方便和正交方法互相验证；如果您的课题需要的是位点级定量而不是区域级富集，会很合适。
这项服务如何支持 m7G 修饰研究？
我们会在单碱基分辨率上分析 m7G，帮您探索它在 RNA 功能与调控中的作用，为后续研究提供证据基础。
高分辨率 m7G 检测有何价值？
准确的 m7G 图谱能增强研究结论的证据力，让后续研究更扎实。
这项服务是否也覆盖 lncRNA？
是的，我们提供mRNA修饰和mRNA 与长链非编码 RNA（lncRNA）修饰两类服务供选择。两类转录本可以在同一次实验里一起分析，您不必拆成两个项目，研究范围也随之打开。
参考文献
[1] m7G-quant-seq: Quantitative Detection of RNA Internal N7-Methylguanosine. ACS Chemical Biology 2022;17(12). DOI: 10.1021/acschembio.2c00792. PMID: 36398936.