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RNA 修饰检测服务 · 单碱基分辨率定位与定量 服务总览 免费热线 400-886-5058

RNA 修饰 RIP 测序

先用富集把修饰片段收窄、再测序比较 —— 这一线回答的是「哪些转录本或区段上有修饰」,以及不同样本之间这个分布怎么变;它不解析到单个碱基。

01这条线报什么

RNA 修饰 RIP 测序是用抗体(或酶学手段)把带修饰的片段富集下来、再测序比较的一类路线。它给出的是区段层面的富集图谱:哪些转录本、哪些区域上有修饰,以及不同样本之间这个分布的变化。

因此它适合先筛:样本量大、候选未知时,用富集路线把范围收窄,再把候选区段放到单碱基路线上定位与定量。富集倍数不等于修饰比例,抗体本身也有结合偏好,这两点决定了它不适合直接当作位点级结论。

本组的方法分两类:抗体免疫沉淀(MeRIP 类、acRIP、O8G-IP、Ψ-RIP、hMeRIP),以及不经过抗体的富集路线(如 m6Am-Exo-Seq 的核酸外切酶处理)。页面里会写明每条路线到底走不走抗体。

029 条富集路线

按修饰类型排列,每条方法都按同一套结构展开:服务优势、背景与检测原理、实验流程、生物信息分析与交付、研究应用、常见问题与参考文献。

m6Am

m6Am-Exo-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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m6A

MeRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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m7G

MeRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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m5C

MeRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

查看方法说明 →

m1A

MeRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

查看方法说明 →

ac4C

acRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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O8G

O8G-IP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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Ψ

Ψ-RIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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5hmC

hMeRIP-Seq

抗体或酶学富集路线,报告区段层面的富集。

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03与单碱基路线怎么配合

两条线回答的不是同一个问题,配合起来才完整:

阶段走哪条线拿到什么
先缩小范围RIP 富集(本页)哪些转录本与区段需要继续分析
再定位与定量单碱基修饰测序具体位点位置与修饰比例
富集路线把范围收窄,单碱基路线把位点定下来 —— 先用哪条,取决于样本量和问题的新鲜度。Garcia-Campos M A. et al., Cell 2019 · DOI 10.1016/j.cell.2019.06.013

04服务范围与交付

多数路线提供 mRNA、或 mRNA 与 lncRNA 两种转录本范围;具体到每条方法见对应页面。

通用交付内容

  • 原始测序数据(FASTQ)与配对的 Input 文库数据(如方法设有对照)。
  • 质控报告,含比对文件与核心比对统计。
  • 富集区段表(XLSX):区段坐标、宿主基因与富集倍数。
  • 富集图谱与分布图(PDF/PNG)。
  • 差异富集分析表、功能富集报告与基因组浏览器轨道文件。

05常见问题

RIP 路线能给出具体的修饰位点吗?

不能。它给的是区段层面的富集分布;要位点位置与修饰比例,需要另走单碱基路线。两条线常常是配合使用的。

富集倍数能当修饰比例用吗?

不建议。富集倍数反映的是抗体把该片段拉下来的效率,受抗体亲和力与片段长度影响,不等于该位点的修饰比例。

为什么一定要配 Input 对照?

Input 给出同一批样本未富集时的背景。没有对照,富集信号无法与背景区分,也就无法判断哪些区段是真信号。

样本量大的项目怎么设计?

这正是这条线的强项:可以先按分组做富集测序,筛出变化明显的区段,再挑代表性样本走单碱基路线确认。

这组里有没有不走抗体的路线?

有。例如 m6Am-Exo-Seq 用核酸外切酶处理实现富集,不经过抗体免疫沉淀;它归在这一组是因为路线同为先富集再测序,页面上会写明这一点。

不确定该从哪条路线入手?

把样本类型、物种与研究问题发给我们,我们按你的问题给出可执行的检测组合建议。