01这条线报什么
RNA 修饰芯片是用末端标记定量一类的读出方式:每个项目选测一种修饰类型,在面板覆盖的范围内一次读出多种 RNA 分子的修饰水平。它给出的是修饰水平:某类修饰在样本里高了还是低了。
它不定位到单碱基,也不解析到具体位点。所以它适合用来筛:把样本量大的队列先过一遍,找出修饰水平有明显差异的分子与修饰类型,再把候选交给单碱基路线确认位置与比例。
芯片的读出不受逆转录与 PCR 扩增偏倚影响,低丰度分子也能拿到信号,这是它在队列筛选里比测序路线更省事的地方。
03与单碱基路线怎么配合
两条线的分工很清楚:
| 阶段 | 走哪条线 | 拿到什么 |
|---|---|---|
| 先批量筛 | RNA 修饰芯片(本页) | 哪些分子、哪类修饰在样本间有差异 |
| 再定位与定量 | 单碱基修饰测序 | 具体位点位置与修饰比例 |
芯片负责在队列里找出差异,单碱基路线负责把差异落到位点上 —— 顺序对了,样本成本才省得下来。Garcia-Campos M A. et al., Cell 2019 · DOI 10.1016/j.cell.2019.06.013
04服务范围与交付
芯片每次覆盖的范围与可测的修饰类型,见各芯片页面的说明;部分路线一次只测一类修饰,需要按研究问题选择。
通用交付内容
- 芯片原始信号数据与扫描图像文件。
- 质控报告:信号强度分布、重复性统计与不合格样本标记。
- 修饰水平结果表(XLSX):分子、修饰类型与信号值。
- 差异修饰分析表(XLSX),含倍数变化与统计显著性。
- 聚类热图、火山图与分布图(PDF/PNG)。
05常见问题
芯片能给出具体位点吗?
不能。芯片给的是修饰水平,不定位到单碱基。要位点位置与修饰比例,需要把候选样本交给单碱基路线。
一次能测几类修饰?
取决于芯片路线:面板覆盖的修饰范围不同,但每个项目通常选测一种修饰类型。具体覆盖范围见对应芯片页面。
为什么芯片适合大样本?
它的读出不依赖逆转录与 PCR 扩增,低丰度分子也能拿到信号,在队列规模上比逐样本测序更省事。
芯片和测序的结论会打架吗?
两者的读数单位不同:芯片给水平、测序给位点与比例。同一个样本上方向一致是正常的,不一致时通常是候选分子的选择问题,而不是方法冲突。
筛选之后一定要做单碱基验证吗?
看研究问题。如果结论只需要「哪类修饰变了」,芯片就够了;如果要写清「哪一个位点、改了多少」,就需要单碱基路线。