跳到正文
RNA 修饰检测服务 · 单碱基分辨率定位与定量 服务总览 免费热线 400-886-5058

预设计引物套装

针对单个成熟 tRNA、tRF 与 tiRNA、以及功能性 lncRNA 的定量引物对,按 SYBR Green 实时定量体系设计并预先完成验证。

01这一组是什么

预设计引物套装是针对单个靶标的实时定量 PCR 引物对:在设计阶段就完成设计与验证,实验室不必自己合成再逐条试。每一对都按 SYBR Green 实时定量体系使用。

覆盖三类靶标。成熟 tRNA 按同工受体逐条定量;tRF 与 tiRNA 从用接头法处理过的片段样品里定量;功能性 lncRNA 则按转录本逐条定量。每一对引物都属于一套 PCR 体系,所以配套的反转录试剂也会一并说明。

02三套引物

每个条目的靶标清单与规格以产品线当前维护的版本为准。

引物套装靶标与验证
rtStar™ Pre-designed tRNA Primer Sets(人 / 小鼠)
针对单个成熟 tRNA 的引物对,人源与小鼠两套分别按成熟 tRNA 注释设计,并在血清样品中做过验证。
rtStar™ Pre-designed tRF & tiRNA Primer Sets(人 / 小鼠)
针对单个 tRF 与 tiRNA 的引物对,按片段样品所用的接头法 cDNA 合成路线设计。
rtStar™ Pre-designed Functional LncRNA Primer Sets(人 / 小鼠)
针对单个功能性 lncRNA 转录本的引物对,在多种培养细胞与组织中做过验证。

03验证方式

tRNA 引物在血清样品里做过验证,这是成熟 tRNA 定量最常被尝试、也是引物设计不佳时最可能失败的一类样品。两套引物分别跟随成熟 tRNA 的注释。

tRF 与 tiRNA 引物的验证覆盖多种样品类型,因为片段会从组织、细胞与体液中读出。功能性 lncRNA 引物则在多种培养细胞与组织中完成验证。三套都按同一种实时定量扩增试剂的条件做验证。

把设计、合成与验证放在订购之前完成,靶标定量就把工作量从每个实验室转移到了产品线上——这也是逐条定量在少数靶标场景下更直接的原因。Squires J E. et al., Nucleic Acids Research 2012 · DOI 10.1093/nar/gks144

04配套试剂

引物套装与反转录试剂是一起选的,搭配关系如下:

  • 成熟 tRNA 引物套装 — 配 tRNA 前处理与一链 cDNA 合成试剂。
  • tRF 与 tiRNA 引物套装 — 配带 3′ 与 5′ 接头的一链 cDNA 合成试剂。
  • 功能性 lncRNA 引物套装 — 配一链 cDNA 合成试剂。
  • 三套通用 — Arraystar SYBR® Green Real-time qPCR Master Mix。

05常见问题

一套引物大致能做多少反应?

每套引物支持的规格与反应数写在对应条目的信息里,建议先确认自己的板式需要多少反应,再决定订几套。如果需要的数字没有列出来,可以在下单前问清。

tRNA 引物能在血清样品上用吗?

tRNA 引物是在血清样品里完成验证的,配同一套扩增试剂时扩增特异性良好。血清恰好是成熟 tRNA 定量最常被尝试、也最容易暴露引物设计问题的一类样品。

用引物套装之前需要做前处理吗?

tRNA 与 tRF/tiRNA 两类需要。内部修饰会阻断反转录,片段的末端也要先修复才能连接接头,所以前处理包含在配套的反转录流程里,不是额外单独购买的一步。功能性 lncRNA 引物走标准的一链反应。

lncRNA 靶标该选哪一套?

用功能性 lncRNA 引物套装,配一链 cDNA 合成试剂,扩增用同一套实时定量试剂。靶标清单里列了覆盖哪些转录本,可以先核对清单再决定订购。

预设计套装能覆盖一个不在清单里的靶标吗?

预设计覆盖的是清单内的靶标。如果关心的靶标不在清单里,可以先确认清单范围,再决定是换一个靶标,还是走定制设计;这一步通过咨询入口确认最快。

不确定该从哪条路线入手?

把样本类型、物种与研究问题发给我们,我们按你的问题给出可执行的检测组合建议。