01这一组是什么
覆盖三类靶标。成熟 tRNA 按同工受体逐条定量;tRF 与 tiRNA 从用接头法处理过的片段样品里定量;功能性 lncRNA 则按转录本逐条定量。每一对引物都属于一套 PCR 体系,所以配套的反转录试剂也会一并说明。
02三套引物
每个条目的靶标清单与规格以产品线当前维护的版本为准。
| 引物套装 | 靶标与验证 |
|---|---|
| rtStar™ Pre-designed tRNA Primer Sets(人 / 小鼠) 针对单个成熟 tRNA 的引物对,人源与小鼠两套分别按成熟 tRNA 注释设计,并在血清样品中做过验证。 | |
| rtStar™ Pre-designed tRF & tiRNA Primer Sets(人 / 小鼠) 针对单个 tRF 与 tiRNA 的引物对,按片段样品所用的接头法 cDNA 合成路线设计。 | |
| rtStar™ Pre-designed Functional LncRNA Primer Sets(人 / 小鼠) 针对单个功能性 lncRNA 转录本的引物对,在多种培养细胞与组织中做过验证。 |
03验证方式
tRNA 引物在血清样品里做过验证,这是成熟 tRNA 定量最常被尝试、也是引物设计不佳时最可能失败的一类样品。两套引物分别跟随成熟 tRNA 的注释。
tRF 与 tiRNA 引物的验证覆盖多种样品类型,因为片段会从组织、细胞与体液中读出。功能性 lncRNA 引物则在多种培养细胞与组织中完成验证。三套都按同一种实时定量扩增试剂的条件做验证。
04配套试剂
引物套装与反转录试剂是一起选的,搭配关系如下:
- 成熟 tRNA 引物套装 — 配 tRNA 前处理与一链 cDNA 合成试剂。
- tRF 与 tiRNA 引物套装 — 配带 3′ 与 5′ 接头的一链 cDNA 合成试剂。
- 功能性 lncRNA 引物套装 — 配一链 cDNA 合成试剂。
- 三套通用 — Arraystar SYBR® Green Real-time qPCR Master Mix。
05常见问题
一套引物大致能做多少反应?
每套引物支持的规格与反应数写在对应条目的信息里,建议先确认自己的板式需要多少反应,再决定订几套。如果需要的数字没有列出来,可以在下单前问清。
tRNA 引物能在血清样品上用吗?
tRNA 引物是在血清样品里完成验证的,配同一套扩增试剂时扩增特异性良好。血清恰好是成熟 tRNA 定量最常被尝试、也最容易暴露引物设计问题的一类样品。
用引物套装之前需要做前处理吗?
tRNA 与 tRF/tiRNA 两类需要。内部修饰会阻断反转录,片段的末端也要先修复才能连接接头,所以前处理包含在配套的反转录流程里,不是额外单独购买的一步。功能性 lncRNA 引物走标准的一链反应。
lncRNA 靶标该选哪一套?
用功能性 lncRNA 引物套装,配一链 cDNA 合成试剂,扩增用同一套实时定量试剂。靶标清单里列了覆盖哪些转录本,可以先核对清单再决定订购。
预设计套装能覆盖一个不在清单里的靶标吗?
预设计覆盖的是清单内的靶标。如果关心的靶标不在清单里,可以先确认清单范围,再决定是换一个靶标,还是走定制设计;这一步通过咨询入口确认最快。