|
单细胞测序技术服务 靶向单细胞测序（lncRNA&mRNA） 单细胞测序 |
|
生物分子凝聚体研究 HyPro靶RNA临近标记技术 |
|
NGS测序技术服务 R-loop 测序（DRIPc-seq） |
|
NGS测序技术服务 环状DNA测序（eccDNA测序） |
|
Ribo-seq Ribo seq（ribosome profiling） |
核糖体-新生肽链复合物(RNC) RNC联合 circRNA芯片 RNC联合 lncRNA芯片 RNC-seq |
|
蛋白表达定量 Label free非标定量 TMT标记定量 PRM靶向定量 |
超级增强子lncRNA（SE-lncRNA）一般具有稳定性差、半衰期短的特点。它们能以极低的拷贝数发挥顺式作用，激活靶基因的表达。比如，SE-lncRNA HOTTIP可激活HOXA基因簇，其在细胞中的平均拷贝数少于1。
为了精确地检测这些瞬时、低水平的SE-lncRNA，Arraystar科学家开发了一套高效的线性扩增方法，能够为多聚腺苷化或非多聚腺苷化的转录本产生足量的荧光标记cRNA。在此过程中，将分别携带有T7聚合酶启动子序列的oligo(dT)和随机引物以优化后的比例进行混合，作为反转引物合成cDNA第一链，随后进行双链cDNA合成与PCR扩增。最后，由T7 RNA聚合酶进行体外转录，合成带有Cy3或Cy5标记的cRNA（下图）。
该标记方法极大的增加了低丰度或降解RNA分子的cRNA产物，比传统方法提高了100多倍。
图释：Arraystar公司SE-lncRNA芯片cRNA标记流程。(1) cDNA第一链合成与5’接头退火。 以携带有T7聚合酶启动子序列的oligo(dT)和随机引物混合物为反转引物，合成cDNA第一链，并与5’接头退火，合成cDNA第二链。(2) PCR扩增。使用RT引物和5’接头序列对双链cDNA进行低循环数的PCR扩增。(3)体外转录和标记反义RNA (aRNA)。以Cy3或Cy5标记的核苷酸为底物，双链cDNA为模板，使用T7 RNA聚合酶进行体外转录，合成带有荧光标记的反义RNA。线性扩增保留了原始转录本的相对水平和完整序列，且无3’偏好性。
相关服务：
